UDK 579.842.23+ 616-092.19

Т.П. Старовойтова, Т.А. Иванова, Г.Б. Мухтургин, С.А. Витязева, В.И. Дубровина,

К.М. Коритов, С.В. Балахонов

ПРОМЕНИ В КЛЕТЪЧНИЯ СЪСТАВ НА ПЕРИТОНЕАЛНАТА ТЕЧНОСТ НА БЕЛИ МИШКИ ПРИ ИНФЕКЦИОНЕН ПРОЦЕС, ПРИЧИНЕН ОТ YERSINIA PESTIS С РАЗЛИЧЕН ПЛАЗМИДЕН СЪСТАВ

Иркутски изследователски противочумен институт на Сибир и Далечния изток (Иркутск)

Статията представя данни за ефекта на плазмидния състав на чумния микроб върху субпопулационния състав на мононуклеарните клетки в перитонеалната течност на бели мишки в ранните стадии на инфекциозния процес. Показано е, че промяната в клетъчния състав на перитонеалната течност на опитни животни зависи от плазмидния профил на щамовете на чумния микроб. По време на експеримента бяха разкрити и фази в промяната на количествения състав на мастоцитите в перитонеалната течност на бели мишки, заразени с щамове Yersinia pestis с различен плазмиден спектър. Ключови думи: Yersinia pestis, перитонеална течност, вирулентност

ПРОМЕНИ В КЛЕТЪЧНИТЕ КОМПОНЕНТИ НА ПЕРИТОНЕАЛНАТА ТЕЧНОСТ НА БЕЛИ МИШКИ С ИНФЕКЦИЯ, ПРИЧИНЕНА ОТ YERSINIA PESTIS С РАЗЛИЧЕН ПЛАЗМИДЕН ПРОФИЛ

Т.П. Старовойтова, Т.А. Иванова, Г.Б. Мухтургин, С.А. Витязева, В.И. Дубровина,

К.М. Коритов, С.В. Балахонов

Иркутски противочумен изследователски институт на Сибир и Далечния изток, Иркутск

Статията представя данни за влиянието на плазмидния профил на Yersinia pestis върху субпопулационната структура на мононуклеарните клетки на перитонеалната течност на мишки в ранните стадии на инфекциозния процес. Показано е, че промяната в клетъчния състав на перитонеалната течност на опитните животни зависи от плазмидния профил на щамовете Yersinia pestis. Определя се фазовият характер на промените в количествения състав на мастоцитите на перитонеалната течност на бели мишки, заразени с щамове Y. pestis с различен плазмиден спектър. Ключови думи: Yersinia pestis, перитонеална течност, вирулентност

По-голямата част от вирулентните фактори на Yersinia pestis са свързани с плазмидния състав. Геномът на патогена на чумата на основния подвид - Yersinia pestis subspecies pestis - има три плазмида - pYY (45MDa), pYP (6MN) и pYT (61MDa), тяхната роля в прилагането на патогенните свойства на Yersinia е добре известна. изучавани. С наличието на pYV плазмид, щамовете Yersinia показват много фенотипни характеристики: клетъчна адхезия, автоаглутинация, повърхностна аглутинация, както и синтеза на външни мембранни протеини, включително V- и W-антигени и други протеини, чието действие е насочен към потискане на фагоцитната активност на имунните клетки системи. Плазмидите pYP и pYT са видоспецифични. Плазмидът pYP определя синтеза на бактериоцин пестицин 1 и плазминогенен активатор, а плазмидът pYT кодира два от най-добре проучените вирулентни фактори - миши токсин и F1 капсула. Отличителна черта на патогена, циркулиращ във фокуса на Тува, е наличието в неговия геном на допълнителен четвърти плазмид pTR33 с все още неясни функции. Смята се, че този плазмид е генетично модифициран 9,5 kD резидентен плазмид, носещ гените pla (плазминогенен активатор) и pstl (пестицин 1). Загубата на плазмид води до промяна в биохимичните, културните свойства, както и до намаляване или пълна загуба на вирулентността на патогена.

Водещият клиничен признак на чумна инфекция и интоксикация, който определя тежестта на протичането

и резултатът от заболяването е нарушение на хомеостазата на макроорганизма. Първични мишени за ендотоксина са полиморфонуклеарни левкоцити, макрофаги, моноцити, ендотелни клетки и други клетъчни елементи. Промените в клетъчния състав на перитонеалната течност могат да се разглеждат като диагностичен критерий за тежестта на заболяването при много заболявания, включително чума. В тази връзка голям интерес представлява оценката на количествения и качествен клетъчен състав на перитонеалната течност при бели мишки с инфекциозен процес, причинен от Y. pestis с различен плазмиден състав.

Цел на работата: да се изследва динамиката на промените в субпопулационния състав на мононуклеарните клетки в перитонеалната течност на бели мишки в ранните стадии на експериментална инфекция с чума.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Експериментален модел в експериментите бяха 175 безпородни, но стандартни по отношение на условията на отглеждане и тегло (18-20 g) бели мишки от двата пола. Животните са изтеглени от експеримента в съответствие с Правилата за лабораторна практика в Руската федерация, одобрени със заповед на Министерството на здравеопазването на Руската федерация № 267 от 19 юни 2003 г., и Националния стандарт на Руската федерация GOST R 53434-2009 Принципи на добрата лабораторна практика.

Използвахме 6 щама Y. pestis subsp. pestis и Y. pestis subsp. алтайка от колекцията на Ир-

маса 1

Характеристика на изследваните щамове на чумния микроб

Щам Място на изолиране Състав на плазмида Вирулентност за бели мишки (RbO), m.c.

Y. pestis subsp. pestis I-2638 Естествен фокус на чума от Тува pYP+pYV+pTP33+pYT+ 10 / силно вирулентен

Y. pestis subsp. pestis I-3479 Иркутски противочумен институт pYP+pYV-pTP33+pYT+ авирулент

Y. pestis subsp. pestis I-3480 Иркутски противочумен институт pYP-pYV-pTP33+pYT+ авирулент

Y. pestis subsp. altaica I-2359 Горно-Алтай естествено огнище на чума pYP+pYV+pYT+ 4 x 104/слабо вирулентен

Y. pestis subsp. altaica I-2948 Горно-Алтай естествено огнище на чума pYP-pYV+pYT+ 3 x 108/остатъчна вирулентност

Y. pestis subsp. altaica I-2948/3 Иркутски противочумен институт pYP-pYV-pYT+ авирулент

Кутски изследователски противочумен институт на Роспотребнадзор (Таблица 1).

Интактните бели мишки бяха разделени на 6 експериментални и 1 контролна група от по 25 мишки всяка. Животните от опитните групи бяха инфектирани с Y. pestis в концентрация 1 х 106 mc в обем 0,5 ml по интраперитонеален метод. Първата експериментална група животни е инжектирана с двудневна култура от Y. pestis subsp., отглеждана при температура 28 °C. pestis I-2638, група II - Y. pestis subsp. pestis I-3479, група III - Y. pestis subsp. pestis I-3480, IV експериментална група животни са заразени с референтния горноалтайски щам на Y pestis subsp. altaica I-2359, група V - Y. pestis subsp. altaica I-2948, група VI - със селекционен щам Y. pestis subsp. алтайка I-2948/3.

Вземането на проби от опитни животни (перитонеална течност) се извършва след 30, 60, 90, 120 и 180 минути. Общият брой ядрени клетки в 1 ml перитонеална течност се преброява във фиксирани препарати, оцветени по стандартни методи. За бактериологичен анализ кръвта от сърцето и перитонеалната течност (по 0,1 ml) се инокулират върху твърда хранителна среда (агар на Хотингер, рН 7,2).

В работата са използвани методи на обзорна микроскопия. Количествената оценка на общия брой левкоцити се извършва с помощта на унифициран метод за преброяване на клетките в камерата на Goryaev. Процентът на различните видове левкоцити се определя чрез метода на морфологично изследване на перитонеална течност в намазки. При изследване на препарати с помощта на компютърната програма "MoticImagesPlus" (версия 2) е извършено диференцирано преброяване на тъканните базофили (ТБ), измерени са техният диаметър и площ. Степента на активиране на МС се оценява чрез индекса на клетъчна дегранулация (IDTC) - процентното съотношение на дегранулирани мастни базофили към общия им брой.

Автоматичният анализ на изображението се извършва с помощта на светлинен микроскоп Zeiss (Германия) с видеокамера Moticam 2000, разделителна способност 1392 x 1040 пиксела, прибл. 10, кн. 100.

Значимостта на резултатите от изследването е получена чрез математически методи за статистическа обработка с помощта на сравнителен анализ чрез t-тест на Стюдънт и използване на компютърната програма Statistica, версия 6.0 (StatSoft Inc. 19842001, IPHI 31415926535897) и софтуерния пакет

Microsoft Office Excel (2003). Резултатите се считат за значими по отношение на контрола на стр< 0,05.

РЕЗУЛТАТИ И ДИСКУСИЯ

Общият брой на клетките в перитонеалната течност при непокътнати животни е 4,3 ± 0,9 х 103 в 1 cm3, докато макрофагите са преобладаващият клетъчен тип и представляват 60,5 ± 5,6% от общия брой клетки, а лимфоцитите 17,0 ± 2,8%; 5,5 ± 0,8% са мезотелиални клетки и други клетъчни елементи.

При заразени бели мишки се наблюдава фазичност в промяната на общия брой ядрени клетки. При животни, заразени с вирулентен щам на Y. pestis subsp. pestis I-2638, след 30 минути общият брой на ядрените клетки нараства рязко до 1,5 ± 0,4 x 104 в 1 cm3, което е 3,4 пъти по-високо, отколкото при непокътнати животни. До 60 минути от изследването показателите намаляват до непокътнати стойности, като продължават да намаляват в следващите периоди. Цитологичната картина на перитонеалната течност има ясна връзка с инфектиращата култура. При животни от група I, 30 минути след заразяването, се наблюдава увеличение на броя на лимфоцитите, надвишаващо стойността при непокътнати животни 4 пъти поради рязко намаляване на броя на моноцитите. Тези промени са открити във всички периоди на наблюдение. В перитонеалната течност на бели мишки, заразени с Y. pestis subsp. pestis I-2638, след 120 минути от началото на експеримента се регистрира увеличение на броя на сегментираните неутрофили с 2,5 пъти в сравнение с контролата (p< 0,05), и незначительное увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов. На последнем сроке исследования в мазках перитонеальной жидкости выявляется большое количество фибробластов, агрегация лимфоцитов и большое количество делящихся клеток.

Бели мишки, заразени с Y. pestis subsp. altaica I-2359, Y. pestis subsp. pestis I-3479 и Y. pestis subsp. altaica I-2948/3, 30 минути след началото на експеримента, няма статистически значими промени. До 180 min броят на ядрените клетки в перитонеалния ексудат надвишава контролните стойности с 2,8 (p< 0,01), 1,9 (р < 0,05) и 1,5 раза соответственно. При введении животным Y. pestis subsp. pestis И-3480 и Y. pestis subsp. altaica И-2948 через 30 мин отмечается повышение общего числа ядерных клеток с последующим снижением (120 мин) до уровня контроля, и к 180 мин показатель вновь увеличивается.

При преглед на петна от перитонеална течност при животни от всички експериментални групи се записва клетъчна пролиферация на лимфоцити, хистиоцити, увеличение на еозинофили, тъканни базофили, плазмени клетки, мезотелиални клетки и фибробласти.

Оценката на морфологичните свойства на базофилите, техния брой и функционална активност представляват интерес при изследването на клетъчния състав на перитонеалната течност на заразени животни.

Установено е, че при опитни бели мишки има фаза в промяната на количествения състав на тъканните базофили на перитонеалната течност. Увеличаване на броя им при животни, заразени с Y. pestis subsp. pestis I-2638, се регистрира 60 минути след въвеждането на културата, надвишавайки стойностите при непокътнати животни с 2,6 пъти (p< 0,05). Затем данные показатели снижаются (90-120 мин) до значений ин-тактных животных, к 180 мин вновь возрастают, достигая значений 8,5 против 2,5 в контроле (р < 0,05). Часть ТК представлены интестинальными - незрелыми формами (рис. 1), появление которых можно расценивать как процесс компенсации.

Ориз. 1. Бяла мишка, заразена с Y. pestis subsp. pestis I-2638. перитонеална течност. чревни мастоцити. Оцветяване по Романовски - Гимза, SW. х 100.

В първите срокове на изследването атипичните МС представляват 21,0 ± 1,8% от общия брой МС, до последните условия тези цифри се увеличават до 25,2 ± 2,1%. Атипичните ТС имат минимален функционален потенциал и са много по-малки. Диаметърът на клетката е 6,8-8,6 μm, което е средно 2,3 пъти по-малко (p< 0,05), по сравнению с диаметром типичных ТК. Таких клеток значительно меньше в перитонеальной жидкости белых мышей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2359, и только в период 120-180 мин после заражения отмечаются единичные интестинальные тканевые базофилы. У животных других опытных групп атипичные ТК не выявляются.

Като цяло, активирането на системата TC отразява общото адаптивно преструктуриране на тялото в отговор на въвеждането на антиген. Дегранулацията на тъканните базофили протича по пътя на пълнозърнеста екзоцитоза (фиг. 2). Функционалната активност на тъканните базофили в перитонеалната течност на опитни животни има фазов характер. Отбелязан е най-високият IDTK

при бели мишки 60 минути след заразяване с Y. pestis subsp. pestis I-2638 - 3.9 ± 0.6, което е 18.5 пъти (p< 0,01) выше значения у интактных животных, затем показатель резко снижается, но к 180 мин исследований он вновь повышается, превышая значение в контрольной группе в 4,4 раза (р < 0,01). У селекционных клонов Y. pestis subsp. pestis И-3479 и И-3480 максимальное значение индекса дегрануляции имеет место через 90 мин от начала опыта и составляет 2,0 ± 0,3 и 1,3 ± 0,4 соответственно, при этом у белых мышей II опытной группы показатели во все сроки исследования были выше, чем у животных III опытной группы.

Ориз. 2. Бяла мишка, заразена с Y. pestis subsp. pestis I-2638. перитонеална течност. Мастни клетки. Дегранулация. Оцветяване по Романовски - Гимза, SW. х 100.

Най-изразен фазов характер на промените в тъканните базофили се наблюдава при бели мишки от IV опитна група. Максималната стойност на IDTC пада на втория и четвъртия етап на изследването, надвишавайки стойностите на непокътнати животни с 5,8 и 7,4 пъти (p< 0,05) соответственно. У особей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2948/3, только на двух сроках исследования (60-90 мин) регистрируется увеличение дегрануляции тучных клеток в 3,6 и 2,6 раза соответственно (р < 0,05), в другие сроки данные статистически не значимы. У белых мышей V опытной группы максимальное значение ИДТК приходится на второй и последний срок исследования - 0,99 и 0,92 у. е., при в контроле отмечается 0,21 у. е.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

По този начин развитието на инфекциозния процес в първите часове след инокулацията на патогена на чумата зависи от неговия плазмиден профил, тъй като най-изразените промени в количествения и качествен клетъчен състав на перитонеалната течност са открити при опитни животни, когато са заразени с щамове, съдържащи pYP+pYV+pYT+.

Фазовият модел, разкрит по време на експеримента в промяната на количествения състав на мастоцитите в перитонеалната течност, особено при индивиди, заразени с вирулентния Y. pestis subsp. pestis I-2638 (pYP+pYV+pTP33+pYT+), както и наличието на незрели и атипични форми на МК, показва развитие на компенсаторни процеси.

Като цяло, активирането на мастоцитната система отразява общото адаптивно преструктуриране на тялото в отговор на въвеждането на антиген.

ЛИТЕРАТУРА

1. Анисимов A.N. Ypestis фактори, които осигуряват циркулация и запазване на патогена на чумата в екосистемите на естествените огнища. Съобщение 1 // Molecular Genetics, Microbiol. и вирусол. - 2002. - № 3. - С. 3-23.

Анисимов А.Н. Фактори на Y. pestis, осигуряващи циркулация и запазване на чумния инфекциозен агент в екосистемите на природни огнища. Доклад I // Molekularnaja genetika, mikrobiol. и вирусол. - 2002. - N 3. - С. 3-23. (на английски)

2. Балахонов С.В. Откриване на нуклеотидните последователности на гените pla, pstl и cafl върху 33 kd криптичен плазмид на щамове Yersiniapestis от огнището на чумата в Тува // 8th Int. Symp. на Йерсиния. - Турку, Финландия, 2002. - № 10. - С. 352-355.

Балахонов С.В. Откриване на нуклеотидни последователности на гени pla, pstl и cafl в криптичен плазмид 33 kb щамове Yersinia pestis от огнище на чума в Тува // 8-ми Международен. Symp. на Йерсиния. - Турку, Финландия, 2002. - N 10. - P. 352-355. (на английски)

3. Витязева С.А., Старовойтова Т.П., Бушкова А.В. Тъканните базофили като представители на голяма клетъчна популация на системата APUD. - Деп. във ВИНИТИ № 376-В2010 17.06.2010г. - 18 с.

Витязева С.А., Старовойтова Т.П., Бушкова А.В. Тъканните базофили като представители на многобройната клетъчна популация на APUD-системата. - Деп. във ВИНИТИ N 376-B2010 17.06.2010 г. - 18 часа (на английски)

4. Красноженов Е.П., Федоров Ю.В. Влияние на инфекциозния процес върху морфофункционалните характеристики на тъканните базофили // Zh. микробиол., епидемиол. и имунол. - 1996. - № 1. - С. 107-108.

Красноженов Е.П., Федоров Ю.В. Влияние на инфекциозния процес върху морфофункционалните характеристики

на тъканни базофили // Zhurn. микробиол., епидемиол. и имунол. - 1996. - N 1. - С. 107-108. (на английски)

5. Лебедева С.А., Трухачев А.Л., Иванова В.С., Арутюнов Ю.И. и др.. Променливостта на патогена на чумата и проблемите на неговата диагностика / Ed. S.A. Лебедева. - Ростов на Дон: Антей, 2009. - 533 с.

Лебедева С.А., Трухачев А.Л., Иванова В.С., Арутюнов Ю.И. et al. Разнообразието на инфекциозния агент на чумата и проблемите на неговата диагностика / Ed. от S.A. Лебедева. -Ростов на Дон: Антей, 2009. - 533 с. (на английски)

6. Меншиков В.В. и др.. Лабораторни методи за изследване в клиниката. - М.: Медицина, 1987. - 365 с.

Меншиков В.В. et al. Лабораторни методи на изследване в клиниката. - Москва: Медицина, 1987. - 365 с. (на английски)

перитонеална течносте смазваща течност (произведена и абсорбирана от перитонеума), намираща се в коремната кухина. Коремът е пространството между коремните органи (като стомаха, далака, черния дроб и жлъчния мехур) и мембраната, която покрива коремната стена.

Перитонеалната течност е бистра, стерилна течност, съставена основно от вода и малки количества бели кръвни клетки, антитела, електролити и други биохимикали. Основната функция на перитонеалната течност е да намали триенето, причинено от движението на коремните органи.

Причини за анализ

При здрави хора коремната кухина съдържа малко количество перитонеална течност. Но някои проблеми могат да доведат до прекомерното му натрупване. Тази течност, наричана още асцитна течност, може да доведе до състояние, наречено асцит. Това е едно от усложненията, причинени от цироза.

Някои инфекции и микроорганизми също могат да причинят перитонит, възпаление на перитонеалната мембрана.

В този случай се извършва култура на перитонеална течност. Това е необходимо, за да се диагностицира проблемът и да се започне лечение.

Култура на перитонеална течност

Това е лабораторен тест, при който се взема проба от течност от коремната кухина, която след това се изследва за микроорганизми, бактерии и гъбички, които могат да причинят инфекция.

Процедура

Част от перитонеалната течност ще бъде отстранена от корема и изпратена в лабораторията за култура и оцветяване по грам. Процедурата за вземане на проби се нарича.

Подготовка

Преди да започнете лапароцентеза, е необходимо да изпразните пикочния мехур.

Мястото на пункцията се почиства с антисептик.

Анестезирайте (използвайки локална анестезия).

Те ще вкарат игла (или тракар с канюла, за която могат да направят малък разрез) и ще вземат проба от течност.

При извличане на голям обем течност пациентът може да почувства леко замайване.

Рискове, свързани с процедурата

Има малък риск иглата да пробие пикочния мехур, червата или кръвоносния съд. Това може да доведе до перфорация и кървене или инфекция на червата.

Ракът на яйчниците и шийката на матката са водещите ракови заболявания, водещи до смърт при жените. Коварството на тези заболявания е, че често не се проявяват по никакъв начин или имат леки симптоми. Поради това туморът може да нарасне до сериозни размери, преди да бъде открит. Цитологичното изследване на перитонеалната течност може да бъде много полезно за откриване на ракови клетки или други генетични аномалии на яйчниците и шийката на матката в ранен стадий.

Изследването на телесните течности обхваща няколко аналитични дисциплини. Тя включва преброяване и диференциране на клетки и други частици. Броенето на клетките и диференцирането им в различни телесни течности, като цереброспинална течност, серозна течност и синовиална течност, е възможно с нашите анализатори от серия XN и някои анализатори от X-клас. Преброяването и диференцирането на клетките в телесните течности е важен аспект от процеса на поставяне на правилна диагноза. Такъв анализ може да се наложи по различни причини, които зависят единствено от вида на телесната течност.

Автоматизирането на тези манипулации с телесни течности има няколко предимства пред ръчните методи, които включват използването на традиционна камера за броене. Това е бързо и удобно. В същото време качеството на анализа не зависи от субективното ниво на обучение на служителя, във връзка с което този метод осигурява стандартизирането на процедурата за диференцирано изчисление. В допълнение, броят на отнемащите време ръчни преброявания в камерата за преброяване е намален.

Тъй като клетките в телесните течности, особено неутрофилите, се разграждат бързо, пробата трябва да се анализира възможно най-бързо.

Цереброспинална течност (CSF)

Цереброспиналната течност е бистра телесна течност под формата на физиологичен разтвор с ниско съдържание на протеини, дължащо се на ултрафилтрация на кръвта. Той запълва пространството между черепа, мозъка и вентрикулите и обгражда гръбначния мозък. CSF служи като "амортисьор" за мозъка и гръбначния мозък, транспортира хормони и невротрансмитери, подпомага отстраняването на токсични метаболити и осигурява постоянна среда за мозъка. Един здрав възрастен съдържа между 100 и 150 ml от тази течност, а дневните нива на производство обикновено са около 500 ml.

Клетъчният анализ на цереброспиналната течност е необходим за идентифициране или изключване на заболявания, които засягат централната нервна система: инфекции, причинени от бактерии, вируси, гъбички или протозои; възпаление (напр. множествена склероза или остър идиопатичен полиневрит); менингит (напр. клетки от периферни неоплазми).

Вземането на проби се извършва главно чрез лумбална пункция, по-рядко чрез цистернална пункция. При пациенти с вентрикуларен шънт, например след операция или по време на лечение на хидроцефалия, могат да се вземат проби и от шънта. Вземането на CSF е рутинна процедура, но все пак носи известни рискове, което прави CSF ценен материал.

Плеврална течност

Плевралната течност се натрупва между двата плеврални слоя в пространството около белите дробове, известно като плеврална кухина. При нормално състояние на тялото обемът на плевралната течност не надвишава 10 ml. Излишъкът от тази течност (плеврален излив) се счита за патология. Има различни причини за това състояние, от остра сърдечна недостатъчност (най-честата причина) до пневмония, белодробна емболия, туберкулоза и др.

Клетките на плевралната течност се преброяват и диференцират, за да се определи причината за плевралния излив и да се идентифицира или изключи инфекция на белите дробове или плеврата от бактерии, вируси или протозои. Високата концентрация на неутрофили, например, предполага инфекция, но дори неинфекциозен плеврален излив може да съдържа значителен брой левкоцити, въпреки че в този случай може да има повече мононуклеарни клетки. В допълнение, мезотелиалните клетки се намират постоянно, а раковите клетки могат да бъдат намерени в рак. Ако течността е кървава, това често е резултат от туморна инвазия.

перитонеална течност

Подобно на плевралната течност, перитонеалната течност се счита за ненормална, когато надвишава определен обем, обикновено 10 ml. Перитонеалната течност се натрупва в коремната кухина. Ако тази течност се натрупа в излишък, състоянието е известно като асцит. В повечето случаи асцитът е следствие от цироза на черния дроб, но се среща и при рак, остра сърдечна недостатъчност и дори при туберкулоза. Извършва се анализ на перитонеалната течност, за да се определи причината за нейното присъствие и да се открие или изключи перитонит. Високата концентрация на неутрофили обикновено показва наличието на инфекция, докато кървавият асцит най-често е резултат от туморна инвазия.

перикардна течност

Перикардният излив е необичайно натрупване на течност в перикардната кухина, чийто обем в нормално състояние не надвишава 20-50 ml. Перикардният излив може да се дължи на перикардит, вирусни инфекции, възпалителни заболявания, бъбречна недостатъчност, сърдечна хирургия и др. Що се отнася до други серозни телесни течности (плеврална течност, перитонеална течност), техният анализ служи главно за определяне на тяхната етиология или за откриване или изключване на инфекции.

синовиалната течност

Синовиалната течност е бистра телесна течност, намираща се в ставната кухина, която намалява триенето между ставния хрущял по време на движение. При артрит и инфекция обемът на тази течност се увеличава. Броят на клетките и диференциацията могат да помогнат за идентифициране на възпалителния или инфекциозен характер на ставния излив. Много висока концентрация на бели кръвни клетки (вероятно повече от 100 000/µl) с преобладаване на неутрофили показва наличието на инфекция в ставата.

Течност, произведена по време на продължителна амбулаторна перитонеална диализа (CAPD)

Течността, произведена от продължителна амбулаторна перитонеална диализа (CAPD), не е естествена телесна течност, тъй като не се произвежда физиологично или поради заболяване, а е единствено следствие от лечението на заболяването. Процесът CAPD е алтернатива на хемодиализата за пациенти, страдащи от бъбречно заболяване. При този процес коремната кухина на пациента се използва като мембрана, през която течностите и веществата се отстраняват от кръвта чрез осмоза. Тази процедура се използва при чести инфекции на коремната кухина. Повишените бели кръвни клетки с висок брой неутрофили могат да показват перитонит, докато еозинофилията обикновено се счита за вторичен ефект от използването на катетър.

Пространството на Дъглас или ретроутеринното пространство е анатомично пространство, разположено в задната част на малкия таз на жената. Намира се между задната стена на матката, шийката на матката, влагалищния заден форникс и предната стена на ректума. От физиологична гледна точка се казва, че пространството на Дъглас е свободно, т.е. не съдържа течност или тъкан.

Наличието на следи от течност в ретроутеринното пространство може да означава овулация, в който случай няма причина за безпокойство. По-голям обем течност може да се визуализира по време на трансвагинален ултразвук. Винаги е необходимо да се определи естеството на открития секрет - кървава течност, перитонеална течност (асцит), гной и др. За тази цел често се извършва диагностична пункция на ретроутеринното пространство, за да се получи материал за изследване и да се определи вероятната причина на натрупване на течности.

Причините за наличието на течност в пространството на Дъглас, като правило, са заболявания на гениталните органи, но не винаги. Ако течността в ретроутеринното пространство се появи в определени дни от менструалния цикъл, няма причина за безпокойство.

Полово зрелите жени и момичета редовно - особено веднага след овулацията (точно след половин цикъл) - имат малко количество свободна течност. Въпреки това, ако се установи наличието на течност в първата фаза на цикъла или в края на втората и в големи количества, тогава може да се подозира патология на маточните придатъци или коремната кухина.

Течността в ретроутеринното пространство причинява

Най-честите причини за течност зад матката са заболявания:

• разкъсване на киста на яйчника;
• водянка на яйчника;
• ендометриоза;
• разкъсване на извънматочна бременност;
• аднексит;
• рак на яйчниците;
• перитонит;
• ентерит;
• цироза на черния дроб;
• хиперстимулация на яйчниците (след хормонална стимулация).

В зависимост от естеството на течността зад матката:

Наличието на кървава течност зад матката може да се дължи на:

• кървене в коремната кухина от тазовите органи,
• разкъсване на извънматочна бременност,
• спукани кисти на яйчниците
• огнища на перитонеална ендометриоза.

Голямо количество асцитна (перитонеална) течност може да се дължи на:

• рак на женските полови органи (рак на яйчниците, фалопиевите тръби, шийката на матката),
• цироза на черния дроб,
• недостатъчност на кръвообращението.

Наличието на гнойна течност може да показва:

• възпаление на малкия таз (например, придатъци);
• или коремна кухина (напр. перитонит, възпалително заболяване на червата).

Заболявания, при които има свободна течност в пространството на Дъглас

Разкъсване на киста на яйчника

Кистата на яйчника е необичайно пространство вътре в яйчника, заобиколено от стена. Има няколко вида кисти на яйчниците: прости, пълни със серозна течност, дермоидни кисти и ендометриални кисти (шоколадови кисти, които се образуват по време на ендометриоза). Понякога киста може да се образува на мястото на непукнал фоликул около времето на овулацията - този тип киста има тенденция спонтанно да се реабсорбира. За съжаление, може да се случи и кистата в яйчника да показва наличието на рак. Понякога кистите може да не причиняват симптоми и да се откриват случайно по време на рутинен абдоминален ултразвук. Понякога обаче тяхното присъствие може да причини различни заболявания:

• менструални нередности,
• нередовно кървене, което не е свързано с менструалния цикъл,
• болка в корема,
• болка в областта на яйчника, където се намира кистата.

Случва се кистата да се спука, тогава жената изпитва силна болка, а по време на абдоминална ехография се установява наличие на течност в задматочното пространство. Лечението на кисти, ако те не дават никакви симптоми, може да се състои само в системното им наблюдение. Въпреки това, ако кистите създават проблеми или се увеличават, те трябва да бъдат отстранени (или лапароскопски, или конвенционално, в зависимост от вида на кистата).

Разкъсване на извънматочна (ектопична) бременност

Кога настъпва извънматочна бременност? Извънматочна бременност възниква, когато оплодените яйцеклетки се имплантират на място, различно от тялото на матката. Честотата на извънматочна бременност се оценява на около 1% от всички бременности. Най-честата локализация на извънматочна бременност е фалопиевата тръба. Всъщност ембрионът може да се имплантира почти навсякъде: в шийката на матката, яйчника или корема. Най-опасна за здравето и живота на жената е коремната или цервикалната бременност, но за щастие те се срещат много рядко.

Какви са симптомите на извънматочна бременност? По време на извънматочна бременност може да се появи необичайно отделяне и кървене, освен това има болки в корема, понякога затруднено дефекация. В случай на разкъсване на извънматочна бременност има остра болка в корема, докато ултразвукът ще разкрие течност в торбичката на Дъглас. Лечението на извънматочна бременност винаги е хирургично.

Възпаление на придатъците

За аднексит е характерен така нареченият възходящ път - вагиналните микроби навлизат в по-високите органи на женската репродуктивна система. Доскоро най-често срещаният патоген, причиняващ възпаление на придатъците, беше гонококът. Понастоящем, поради значителното намаляване на случаите на гонорея, бактерията вече не е най-разпространеният организъм. Следните патогени също са включени в етиологичните фактори на аднексита:

• хламидия;
• микоплазма гениталис и други микоплазми;
• коли;
• стрептококи от група В и други стрептококи;
• Гарднерела гарднерела вагиналис.

Хламидиите и гонококите имат най-голям дял в образуването на инфекция, водеща до възпаление на придатъците.

Какви са симптомите на аднексит? На първо място, може да има болка в долната част на корема, обикновено болката е двустранна. Освен това може да е налице диспареуния (болка по време на полов акт), както и необичайно отделяне от гениталния тракт, свързано с възпаление на шийката на матката или влагалището. Има необичайно кървене - междуменструално кървене или много обилно менструално кървене и температура над 38 С. Ултразвуковото изследване може да установи наличие на течност зад матката. Лечението на възпаление на придатъците е използването на антибиотици и симптоматична терапия.

рак на яйчниците

Този рак не предизвиква никакви симптоми за дълго време, наличието на симптоми като болка в долната част на корема, уголемяване на коремната кухина или вагинално кървене, за съжаление, показва тежестта на рака.

перитонит

Наличието на гнойна течност в ретроутеринното пространство може да показва наличието на перитонит и изисква изясняване на диагнозата и изследване на стомашно-чревния тракт и пикочните пътища.

Симптоми на течност в пространството на Дъглас

Симптомите зависят от причината за натрупване на течност. Например, при спукване на киста на яйчника може да се появи болка в коремната кухина, която периодично става остра и режеща, гадене и повръщане, диария и загуба на апетит. При разкъсване на извънматочна бременност, зацапване и кървене от влагалището, болка в долната част на корема, болка в яйчниците и понякога усещане за непълно изпразване на червата.

При възпаление на придатъците се появява внезапна спазматична болка от двете страни на корема, която се усилва по време на полов акт. Понякога се излъчва към слабините и бедрата. Придружен от слабост, треска или фебрилно състояние.

Диагностична пункция през задния форникс на влагалището

Пункцията на задматочното пространство е прост инвазивен метод, особено полезен за диагностициране на кървене в коремната кухина на тазовите органи и за откриване на нарушена извънматочна бременност. Процедурата се извършва под обща анестезия в болнични условия. Пункцията на Дъгласовия джоб се извършва през влагалището с помощта на спринцовка 20 ml и игла с дължина min. 20 см и диаметър 1,5 мм. След поставяне на спекулум, гинекологът вкарва игла през задния форникс на влагалището и след това аспирира съдържанието му в спринцовка.

Понякога пункцията се извършва под ултразвуков контрол, за да се избегне рискът от пробиване на големи тазови съдове. След отстраняване на иглата, съдържанието на спринцовката се изследва внимателно. Полученият материал може да се прехвърли и за цитологично или бактериологично изследване. Откриването на фрагменти от съсиреци или кървава течност може да показва кървене в коремната кухина поради нарушена извънматочна бременност. Това състояние, с наличие на клинични, лабораторни и ултразвукови симптоми, е индикация за операция за отстраняване на нарушена извънматочна бременност, най-често чрез лапароскопски метод.

Липсата на съдържание, получено чрез пункция на ретроутеринната кухина, не изключва кървене в перитонеалната кухина или наличието на извънматочна бременност, особено когато симптомите показват перитонеално дразнене. Кървенето може да е минимално или може да има постинфламаторни сраствания, които предотвратяват вземането на материал за изследване. Наличието на кървава течност също може да показва ендометриоза. Кървавото съдържание на кухината на Дъглас може да се инфектира (суперинфекция), което влошава състоянието на пациент с ендометриоза. Лечението включва аспирация на хемолизирана кръв от торбичката на Дъглас и лапароскопско отстраняване на ендометриозата.

Цитологично изследване на течността

Откриването на повишено количество перитонеална течност може да бъде достатъчна причина за поддържане на онкологична активност. Асцитната течност, събрана по време на пункцията на ретроутеринната кухина, трябва да бъде изпратена за цитологично изследване за потвърждаване или изключване на тумор. Откриването на наличието на ракови клетки в течността от коремната кухина предоставя ценна информация за лекаря, тъй като може да показва появата на първично злокачествено новообразувание на женските полови органи.

При жени, които преди това са имали рак и са претърпели операция, този симптом може да показва рецидив на рака. По правило наличието на туморни клетки в перитонеалната течност е свързано с високо разпространение на рак на женските полови органи, което е неблагоприятен прогностичен фактор при тези пациенти. Трябва да се отбележи, че цитологичното изследване на течност от перитонеалната кухина е само спомагателен метод за откриване на злокачествени тумори на яйчниците, фалопиевите тръби и шийката на матката.

Цитологичното изследване на течния седимент също може да разкрие повишен брой възпалителни клетки, които се появяват при различни възпаления на тазовите органи. И накрая, повишеното количество перитонеална течност е резултат от други заболявания, като цироза на черния дроб или циркулаторна недостатъчност.

Кога трябва да посетите лекар?

Пациентите трябва незабавно да потърсят медицинска помощ, ако в допълнение към повишената течност в кухината на Дъглас са налице следните симптоми:

• болка в корема,
• болезнен полов акт,
• кървене от гениталния тракт, несвързано с менструация, контактно кървене,
• гадене, повръщане,
• бързо увеличаване на обиколката на коремната кухина,
• треска, втрисане,
• отслабване.

Лечение

Лечението зависи от причината за течност в ретроутеринното пространство. Например, ако кистата на яйчника се спука, обикновено е необходима операция за отстраняване на кистата. Ако извънматочната бременност се разкъса, тя трябва да бъде отстранена лапароскопски.