UDK 579.842.23+ 616-092.19

تي بي. ستاروفويتوفا ، ت. إيفانوفا، ج.ب. مختارجين، س.أ. فيتيازيفا ، ف. دوبروفينا،

كم. كوريتوف، إس. بالاخونوف

التغيرات في التركيبة الخلوية للسائل البريتوني للفئران البيضاء أثناء العملية المعدية التي تسببها بكتيريا يرسينيا بيستيس مع تركيبة بلازميدية مختلفة

معهد إيركوتسك لأبحاث مكافحة الطاعون في سيبيريا والشرق الأقصى (إيركوتسك)

تقدم المقالة بيانات عن تأثير التركيبة البلازميدية لميكروب الطاعون على التركيبة السكانية الفرعية للخلايا وحيدة النواة في السائل البريتوني للفئران البيضاء في المراحل المبكرة من العملية المعدية. لقد تبين أن التغير في التركيب الخلوي للسائل البريتوني في حيوانات التجارب يعتمد على المظهر البلازميدي لسلالات ميكروب الطاعون. خلال التجربة، تم الكشف أيضًا عن مراحل التغير في التركيب الكمي للخلايا البدينة في السائل البريتوني للفئران البيضاء المصابة بسلالات يرسينيا بيستيس ذات طيف بلازميد مختلف. الكلمات المفتاحية: يرسينيا بيستيس، السائل البريتوني، الفوعة

التغيرات في المكونات الخلوية للسائل البريتوني في الفئران البيضاء المصابة بالعدوى التي تسببها بكتيريا يرسينيا بيستيس مع خصائص بلازميدية مختلفة

تي بي. ستاروفويتوفا ، ت. إيفانوفا، ج.ب. مختارجين، س.أ. فيتيازيفا ، ف. دوبروفينا،

كم. كوريتوف، إس. بالاخونوف

معهد إيركوتسك لأبحاث مكافحة الطاعون في سيبيريا والشرق الأقصى، إيركوتسك

يعرض المقال بيانات عن تأثير البلازميد يرسينيا بيستيس على التركيبة السكانية الفرعية للخلايا وحيدة النواة للسائل البريتوني لدى الفئران في المراحل المبكرة من العملية المعدية. لقد تبين أن التغير في التركيب الخلوي للسائل البريتوني في حيوانات التجارب يعتمد على المظهر البلازميدي لسلالات يرسينيا بيستيس. تم تحديد صفة الطور في التغيرات في التركيب الكمي للخلايا البدينة للسائل البريتوني في الفئران البيضاء المصابة بسلالات Y.pestis ذات الطيف البلازميد المختلف. الكلمات المفتاحية: اليرسينيا الطاعونية، السائل البريتوني، الفوعة

ترتبط الغالبية العظمى من عوامل فوعة اليرسينيا الطاعونية بتكوين البلازميد. يحتوي جينوم مسبب الطاعون للسلالات الرئيسية - سلالات يرسينيا بيستيس بيستيس - على ثلاثة بلازميدات - pYY(45MDa)، وpYP(6MN)، وpYT(61MDa)، وكان دورها في تنفيذ الخصائص المسببة للأمراض في يرسينيا جيدًا درس. مع وجود بلازميد pYV، تظهر سلالات يرسينيا العديد من السمات المظهرية: التصاق الخلايا، التراص التلقائي، التراص السطحي، بالإضافة إلى تخليق بروتينات الغشاء الخارجي، بما في ذلك مستضدات V وW والبروتينات الأخرى، التي يعمل تأثيرها يهدف إلى قمع نشاط البلعمة للخلايا المناعية. تعتبر البلازميدات pYP وpYT خاصة بالفيديو. يحدد البلازميد pYP تخليق البكتريوسين بيستيسين 1 ومنشط البلازمينوجين، ويشفر البلازميد pYT اثنين من أكثر عوامل الفوعة المدروسة جيدًا - توكسين الفأر وكبسولة F1. السمة المميزة للعامل الممرض المنتشر في بؤرة Tuva هي وجود بلازميد رابع إضافي في جينومه pTR33 مع وظائف لا تزال غير واضحة. يُعتقد أن هذا البلازميد عبارة عن بلازميد مقيم معدل وراثيًا بقدرة 9.5 كيلو دالتون يحمل جينات PLA (منشط البلازمينوجين) وجينات PSTL (بيستيسين 1). يؤدي فقدان البلازميد إلى تغيير في الخصائص البيوكيميائية والثقافية، وكذلك إلى انخفاض أو فقدان كامل لضراوة العامل الممرض.

العلامة السريرية الرائدة لعدوى الطاعون والتسمم، والتي تحدد شدة الدورة

ونتيجة المرض هي انتهاك التوازن في الكائنات الحية الدقيقة. الأهداف الأساسية للسموم الداخلية هي الكريات البيض متعددة الأشكال، والبلاعم، وحيدات، والخلايا البطانية والعناصر الخلوية الأخرى. ويمكن اعتبار التغيرات في التركيب الخلوي للسائل البريتوني معيارا تشخيصيا لشدة المرض في العديد من الأمراض، بما في ذلك الطاعون. وفي هذا الصدد، فإن تقييم التركيب الخلوي الكمي والنوعي للسائل البريتوني في الفئران البيضاء مع عملية معدية تسببها Y. بيستيس مع تكوين بلازميد مختلف هو أمر ذو أهمية كبيرة.

الغرض من العمل: دراسة ديناميكيات التغيرات في التركيبة السكانية الفرعية للخلايا وحيدة النواة في السائل البريتوني للفئران البيضاء في المراحل المبكرة من عدوى الطاعون التجريبية.

المواد والأساليب

النموذج التجريبي في التجارب كان 175 سلالة ولكن قياسية من حيث ظروف الحفظ والوزن (18-20 جم) من الفئران البيضاء من الجنسين. تم سحب الحيوانات من التجربة وفقًا لقواعد الممارسة المعملية في الاتحاد الروسي، والتي تمت الموافقة عليها بأمر وزارة الصحة في الاتحاد الروسي رقم 267 بتاريخ 19 يونيو 2003، والمعيار الوطني للاتحاد الروسي GOST R 53434-2009 مبادئ الممارسة المخبرية الجيدة.

استخدمنا 6 سلالات من Y.pestis subsp. بيستيس و Y. بيستيس subsp. altaica من مجموعة Ir-

الجدول 1

خصائص السلالات المختبرة من ميكروب الطاعون

السلالة مكان العزل تكوين البلازميد الفوعة للفئران البيضاء (RbO)، m.c.

Y. بيستيس سوبسب. بيستيس I-2638 تركيز الطاعون الطبيعي توفا pYP+pYV+pTP33+pYT+ 10 / شديد الفوعة

Y. بيستيس سوبسب. بيستيس I-3479 معهد إيركوتسك لمكافحة الطاعون pYP+pYV-pTP33+pYT+ عديم الفوعة

Y. بيستيس سوبسب. بيستيس I-3480 معهد إيركوتسك لمكافحة الطاعون pYP-pYV-pTP33+pYT+ عديم الفوعة

Y. بيستيس سوبسب. Altaica I-2359 Gorno-Altai تركيز الطاعون الطبيعي pYP+pYV+pYT+ 4 x 104/ضعيف الضراوة

Y. بيستيس سوبسب. Altaica I-2948 تركيز الطاعون الطبيعي Gorno-Altai pYP-pYV+pYT+ 3 x 108/الفوعة المتبقية

Y. بيستيس سوبسب. Altaica I-2948/3 معهد إيركوتسك لمكافحة الطاعون pYP-pYV-pYT+ عديم الفوعة

معهد كوتسك لأبحاث مكافحة الطاعون في Rospotrebnadzor (الجدول 1).

تم تقسيم الفئران البيضاء السليمة إلى 6 مجموعات تجريبية ومجموعتين ضابطتين تضم كل منهما 25 فأرًا. تم إصابة حيوانات المجموعات التجريبية باليرسينيا الطاعونية بتركيز 1×106 ميكرومتر في حجم 0.5 مل بطريقة الحقن داخل الصفاق. تم حقن المجموعة التجريبية الأولى من الحيوانات بمزرعة Y.pestis subsp لمدة يومين والتي نمت عند درجة حرارة 28 درجة مئوية. بيستيس I-2638، المجموعة الثانية - Y. بيستيس subsp. بيستيس I-3479، المجموعة الثالثة - Y. بيستيس subsp. Pestis I-3480، IV أصيبت المجموعة التجريبية من الحيوانات بسلالة Gorno-Altai المرجعية لـ Y Pestis subsp. altaica I-2359، المجموعة V - Y.pestis subsp. altaica I-2948، المجموعة السادسة - مع سلالة مختارة من Y.pestis subsp. ألتيكا I-2948/3.

تم أخذ عينات المواد من حيوانات التجارب (السائل البريتوني) بعد 30، 60، 90، 120 و 180 دقيقة. تم حساب العدد الإجمالي للخلايا النووية في 1 مل من السائل البريتوني في المستحضرات الثابتة الملطخة بالطرق القياسية. للتحليل البكتريولوجي، تم تلقيح الدم من القلب والسائل البريتوني (0.1 مل لكل منهما) على وسط مغذٍ صلب (Hottinger agar، pH 7.2).

واستخدمت أساليب الفحص المجهري المسح في العمل. تم إجراء تقييم كمي للعدد الإجمالي للكريات البيض باستخدام طريقة موحدة لحساب الخلايا في غرفة جوراييف. تم إجراء النسبة المئوية لأنواع مختلفة من الكريات البيض عن طريق طريقة الفحص المورفولوجي للسائل البريتوني في المسحات. في دراسة الاستعدادات باستخدام برنامج الكمبيوتر "MoticImagesPlus" (الإصدار 2)، تم إجراء عدد متباين من الخلايا القاعدية الأنسجة (TC)، وتم قياس قطرها ومساحتها. تم تقييم درجة تنشيط MC بواسطة مؤشر تحلل الخلايا (IDTC) - النسبة المئوية للخلايا القاعدية السارية المحببة إلى العدد الإجمالي.

تم إجراء التحليل التلقائي للصور باستخدام مجهر زايس الضوئي (ألمانيا) مع كاميرا فيديو Moticam 2000، دقة تبلغ 1392 × 1040 بكسل تقريبًا. 10، المجلد. 100.

تم الحصول على أهمية نتائج الدراسة من خلال الأساليب الرياضية للمعالجة الإحصائية باستخدام التحليل المقارن بواسطة اختبار الطالب وباستخدام برنامج الكمبيوتر Statistica، الإصدار 6.0 (StatSoft Inc. 19842001، IPHI 31415926535897) وحزمة البرامج

مايكروسوفت أوفيس إكسل (2003). واعتبرت النتائج هامة فيما يتعلق بالتحكم في ص< 0,05.

النتائج والمناقشة

إجمالي عدد الخلايا في السائل البريتوني في الحيوانات السليمة هو 4.3 ± 0.9 × 103 في 1 سم 3، في حين أن الخلايا البلعمية هي نوع الخلية السائد وتمثل 60.5 ± 5.6٪ من إجمالي عدد الخلايا، والخلايا الليمفاوية 17.0 ± 2.8٪؛ 5.5 ± 0.8% عبارة عن خلايا الظهارة المتوسطة وعناصر خلوية أخرى.

في الفئران البيضاء المصابة، لوحظ الطورية في التغير في العدد الإجمالي للخلايا النووية. في الحيوانات المصابة بسلالة فتاكة من Y.pestis subsp. بيستيس I-2638، بعد 30 دقيقة يزيد العدد الإجمالي للخلايا النووية بشكل حاد إلى 1.5 ± 0.4 × 104 في 1 سم 3، وهو أعلى بمقدار 3.4 مرة من الحيوانات السليمة. وبحلول 60 دقيقة من الدراسة، تنخفض المؤشرات إلى قيم سليمة، وتستمر في الانخفاض في فترات لاحقة. الصورة الخلوية للسائل البريتوني لها علاقة واضحة مع ثقافة العدوى. في حيوانات المجموعة الأولى، بعد 30 دقيقة من الإصابة، لوحظت زيادة في عدد الخلايا الليمفاوية، متجاوزة القيمة في الحيوانات السليمة بمقدار 4 مرات بسبب الانخفاض الحاد في عدد الخلايا الوحيدة. تم الكشف عن هذه التغييرات في جميع فترات المراقبة. في السائل البريتوني للفئران البيضاء المصابة باليرسينيا الطاعونية subsp. بيستيس I-2638، بعد 120 دقيقة من بداية التجربة، تم تسجيل زيادة في عدد العدلات المجزأة بمقدار 2.5 مرة، مقارنة بالتحكم (ص).< 0,05), и незначительное увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов. На последнем сроке исследования в мазках перитонеальной жидкости выявляется большое количество фибробластов, агрегация лимфоцитов и большое количество делящихся клеток.

الفئران البيضاء المصابة باليرسينيا الطاعونية subsp. ألتايكا I-2359، Y.pestis subsp. بيستيس I-3479 و Y. بيستيس subsp. altaica I-2948/3، بعد 30 دقيقة من بدء التجربة، لم تكن هناك تغييرات ذات دلالة إحصائية. بحلول 180 دقيقة، يتجاوز عدد الخلايا النووية في الإفرازات البريتونية قيم التحكم بمقدار 2.8 (ع)< 0,01), 1,9 (р < 0,05) и 1,5 раза соответственно. При введении животным Y. pestis subsp. pestis И-3480 и Y. pestis subsp. altaica И-2948 через 30 мин отмечается повышение общего числа ядерных клеток с последующим снижением (120 мин) до уровня контроля, и к 180 мин показатель вновь увеличивается.

عند فحص مسحات السائل البريتوني في الحيوانات من جميع المجموعات التجريبية، يتم تسجيل تكاثر الخلايا الليمفاوية والخلايا المنسجات وزيادة في الحمضات والخلايا القاعدية للأنسجة وخلايا البلازما والخلايا الظهارية المتوسطة والخلايا الليفية.

يعد تقييم الخصائص المورفولوجية للخلايا القاعدية وعددها ونشاطها الوظيفي محل اهتمام في دراسة التركيب الخلوي للسائل البريتوني في الحيوانات المصابة.

لقد ثبت أنه في الفئران البيضاء التجريبية هناك مرحلة من التغير في التركيب الكمي للخلايا القاعدية للسائل البريتوني. زيادة في أعدادها في الحيوانات المصابة باليرسينيا الطاعونية subsp. بيستيس I-2638، يتم تسجيله بعد 60 دقيقة من إدخال الثقافة، وهو ما يتجاوز القيم في الحيوانات السليمة بمقدار 2.6 مرة (ص)< 0,05). Затем данные показатели снижаются (90-120 мин) до значений ин-тактных животных, к 180 мин вновь возрастают, достигая значений 8,5 против 2,5 в контроле (р < 0,05). Часть ТК представлены интестинальными - незрелыми формами (рис. 1), появление которых можно расценивать как процесс компенсации.

أرز. 1. الفأر الأبيض المصاب باليرسينيا الطاعونية subsp. بيستيس I-2638. السائل البريتوني. الخلايا البدينة المعوية. التلوين حسب رومانوفسكي - Giemsa، SW. × 100.

في الفترات الأولى من الدراسة، شكلت MCs غير النمطية 21.0 ± 1.8٪ من إجمالي عدد MCs، وفي الفترات الأخيرة، ارتفعت هذه الأرقام إلى 25.2 ± 2.1٪. يتمتع المساهمين الأساسيين غير النمطيين بإمكانيات وظيفية ضئيلة وأصغر بكثير. قطر الخلية هو 6.8-8.6 ميكرومتر، وهو في المتوسط ​​2.3 مرة أقل (ص)< 0,05), по сравнению с диаметром типичных ТК. Таких клеток значительно меньше в перитонеальной жидкости белых мышей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2359, и только в период 120-180 мин после заражения отмечаются единичные интестинальные тканевые базофилы. У животных других опытных групп атипичные ТК не выявляются.

بشكل عام، يعكس تنشيط نظام TC إعادة الهيكلة التكيفية العامة للجسم استجابةً لإدخال المستضد. يستمر تحلل الخلايا القاعدية للأنسجة على طول مسار خروج الخلايا الحبيبية الكاملة (الشكل 2). النشاط الوظيفي للخلايا القاعدية للأنسجة في السائل البريتوني لحيوانات التجارب له طابع طوري. ويلاحظ أعلى IDTK

في الفئران البيضاء بعد 60 دقيقة من الإصابة باليرسينيا الطاعونية subsp. بيستيس I-2638 - 3.9 ± 0.6 أي 18.5 مرة (ص)< 0,01) выше значения у интактных животных, затем показатель резко снижается, но к 180 мин исследований он вновь повышается, превышая значение в контрольной группе в 4,4 раза (р < 0,01). У селекционных клонов Y. pestis subsp. pestis И-3479 и И-3480 максимальное значение индекса дегрануляции имеет место через 90 мин от начала опыта и составляет 2,0 ± 0,3 и 1,3 ± 0,4 соответственно, при этом у белых мышей II опытной группы показатели во все сроки исследования были выше, чем у животных III опытной группы.

أرز. 2. الفأر الأبيض المصاب باليرسينيا الطاعونية subsp. بيستيس I-2638. السائل البريتوني. الخلايا البدينة. زوال الحبيبات. التلوين حسب رومانوفسكي - Giemsa، SW. × 100.

لوحظت الشخصية الطورية الأكثر وضوحًا للتغيرات في الخلايا القاعدية للأنسجة في الفئران البيضاء في المجموعة التجريبية الرابعة. تقع القيمة القصوى لـ IDTC في المرحلتين الثانية والرابعة من الدراسة، وتتجاوز قيم الحيوانات السليمة بمقدار 5.8 و7.4 مرة (ع).< 0,05) соответственно. У особей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2948/3, только на двух сроках исследования (60-90 мин) регистрируется увеличение дегрануляции тучных клеток в 3,6 и 2,6 раза соответственно (р < 0,05), в другие сроки данные статистически не значимы. У белых мышей V опытной группы максимальное значение ИДТК приходится на второй и последний срок исследования - 0,99 и 0,92 у. е., при в контроле отмечается 0,21 у. е.

خاتمة

وبالتالي، فإن تطور العملية المعدية في الساعات الأولى بعد تلقيح مسبب الطاعون يعتمد على شكله البلازميد، حيث تم اكتشاف التغييرات الأكثر وضوحًا في التركيب الخلوي الكمي والنوعي للسائل البريتوني في حيوانات التجارب عند إصابتها بسلالات تحتوي على بي واي بي + بي واي في + بي واي تي +.

تم الكشف عن نمط الطور أثناء التجربة في التغير في التركيب الكمي للخلايا البدينة في السائل البريتوني، خاصة في الأفراد المصابين ببكتيريا Y.pestis subsp. بيستيس I-2638 (pYP+pYV+pTP33+pYT+)، وكذلك وجود أشكال غير ناضجة وغير نمطية من MC، يشير إلى تطور عمليات التعويض.

بشكل عام، يعكس تنشيط نظام الخلايا البدينة إعادة الهيكلة التكيفية العامة للجسم استجابةً لإدخال المستضد.

مراجع الادب

1. أنيسيموف أ.ن. عوامل Ypestis التي تضمن تداول وحفظ مسببات الطاعون في النظم البيئية للبؤر الطبيعية. الرسالة 1 // الوراثة الجزيئية، الميكروبيول. والفيروسول. - 2002. - رقم 3. - س 3-23.

أنيسيموف أ.ن. عوامل Y.pestis توفر الدورة الدموية والحفاظ على العامل المعدي للطاعون في النظم البيئية للبؤر الطبيعية. التقرير الأول // Molekuljarnaja genetika، mikrobiol. أنا فيروسول. - 2002. - ن 3. - ص 3-23. (باللغة الإنجليزية)

2. بالاخونوف إس. الكشف عن تسلسل النيوكليوتيدات لجينات pla وpstl وcafl على البلازميد الخفي 33 كيلو دي من سلالات Yersiniapestis من تركيز طاعون Tuva // 8th Int. أعراض. على يرسينيا. - توركو، فنلندا، 2002. - رقم 10. - س 352-355.

بالاخونوف إس. الكشف عن تسلسلات نيوكليوتيدات جينات pla وpstl وcafl في البلازميد الخفي 33 كيلو بايت سلالات يرسينيا بيستيس من تركيز طاعون توفا // 8th Int. أعراض. على يرسينيا. - توركو، فنلندا، 2002. - ن 10. - ص 352-355. (باللغة الإنجليزية)

3. Vityazeva S.A.، Starovoitova T.P.، Bushkova A.V. الخلايا القاعدية الأنسجة كممثلين لعدد كبير من الخلايا في نظام APUD. - قسم. في فينيتي رقم 376-B2010 بتاريخ 17/06/2010. - 18 ثانية.

Vityazeva S.A.، Starovoytova T.P.، Bushkova A.V. الخلايا القاعدية الأنسجة كممثلين للعديد من الخلايا في نظام APUD. - قسم. في فينيتي رقم 376-B2010 17/06/2010. - 18 مساءاً (باللغة الإنجليزية)

4. كراسنوزينوف إي.بي.، فيدوروف يو.في. تأثير العملية المعدية على الخصائص الشكلية للأنسجة القاعدية // Zh. ميكروبيول، وبائيل. والمناعة. - 1996. - رقم 1. - ص 107-108.

كراسنوزينوف إي.بي.، فيدوروف يو.في. تأثير العملية المعدية على الخصائص المورفولوجية

من الأنسجة القاعدية // Zhurn. ميكروبيول، جيبيديول. أنا مناعة. - 1996. - ن1. - ص107-108. (باللغة الإنجليزية)

5. ليبيديفا إس إيه، تروخاتشيف أل، إيفانوفا في إس، أروتيونوف يو.آي. وآخرون تقلب مسببات الطاعون ومشاكل تشخيصه / إد. S. A. ليبيديفا. - روستوف على نهر الدون: أنتي، 2009. - 533 ص.

Lebedeva S.A.، Trukhachev A.L.، Ivanova V.S.، Arutyunov Yu.I. وآخرون. تنوع العامل المعدي الطاعون ومشاكل تشخيصه / إد. بواسطة S.A. ليبيديفا. - روستوف على نهر الدون: أنتي، 2009. - 533 ص. (باللغة الإنجليزية)

6. مينشيكوف ف. وآخرون طرق البحث المختبري في العيادة. - م: الطب 1987. - 365 ص.

مينشيكوف ف. وآخرون. طرق البحث المخبرية في العيادة. - موسكو: ميديسينا، 1987. - 365 ص. (باللغة الإنجليزية)

السائل البريتونيهو سائل تشحيم (يتم إنتاجه وامتصاصه بواسطة الصفاق) موجود في تجويف البطن. البطن هو الحيز الموجود بين أعضاء البطن (مثل المعدة والطحال والكبد والمرارة) والغشاء الذي يبطن جدار البطن.

السائل البريتوني هو سائل واضح ومعقم يتكون بشكل أساسي من الماء وكميات صغيرة من خلايا الدم البيضاء والأجسام المضادة والكهارل والمواد الكيميائية الحيوية الأخرى. وتتمثل المهمة الرئيسية للسائل البريتوني في تقليل الاحتكاك الناجم عن حركة أعضاء البطن.

أسباب التحليل

في الأشخاص الأصحاء، يحتوي تجويف البطن على كمية صغيرة من السائل البريتوني. لكن بعض المشاكل يمكن أن تؤدي إلى تراكمها المفرط. يمكن أن يؤدي هذا السائل، الذي يُسمى أيضًا بسائل الاستسقاء، إلى حالة تسمى الاستسقاء. وهذا أحد المضاعفات الناجمة عن تليف الكبد.

بعض الالتهابات والكائنات الحية الدقيقة يمكن أن تسبب أيضًا التهاب الصفاق، وهو التهاب الغشاء البريتوني.

في هذه الحالة، يتم إجراء ثقافة السائل البريتوني. فهو ضروري لتشخيص المشكلة وبدء العلاج.

ثقافة السائل البريتوني

هذا اختبار معملي يتم فيه أخذ عينة من السوائل من تجويف البطن، ثم يتم فحصها بحثًا عن الكائنات الحية الدقيقة والبكتيريا والفطريات التي يمكن أن تسبب العدوى.

إجراء

سيتم إزالة بعض السائل البريتوني من البطن وإرساله إلى المختبر لزراعته وصبغه بالجرام. تسمى عملية أخذ العينات .

تحضير

قبل البدء ببزل البطن، من الضروري تفريغ المثانة.

سيتم تنظيف موقع الثقب بمطهر.

التخدير (باستخدام التخدير الموضعي).

سيقومون بإدخال إبرة (أو تراكار مع قنية، حيث يمكن عمل شق صغير لها) وإزالة عينة من السوائل.

عند استخراج كمية كبيرة من السوائل، قد يشعر المريض بالدوار الخفيف.

المخاطر المرتبطة بهذا الإجراء

هناك خطر بسيط من أن تخترق الإبرة المثانة أو الأمعاء أو الأوعية الدموية. وهذا يمكن أن يؤدي إلى ثقب ونزيف أو عدوى في الأمعاء.

سرطان المبيض وعنق الرحم هما السرطانان الرئيسيان اللذان يؤديان إلى الوفاة لدى النساء. يكمن خبث هذه الأمراض في أنها في كثير من الأحيان لا تظهر بأي شكل من الأشكال أو تكون لها أعراض خفيفة. ولهذا السبب، يمكن أن ينمو الورم إلى حجم خطير قبل اكتشافه. يمكن أن يكون الفحص الخلوي للسائل البريتوني مفيدًا جدًا في اكتشاف الخلايا السرطانية أو غيرها من التشوهات الجينية في المبيض وعنق الرحم في مرحلة مبكرة.

تشمل دراسة سوائل الجسم العديد من التخصصات التحليلية. ويشمل عد وتمييز الخلايا والجزيئات الأخرى. يمكن إحصاء الخلايا وتمييزها في سوائل الجسم المختلفة، مثل السائل النخاعي والسائل المصلي والسائل الزليلي، من خلال أجهزة تحليل سلسلة XN وبعض أجهزة تحليل الفئة X. يعد عد الخلايا وتمييزها في سوائل الجسم جانبًا مهمًا في عملية إجراء التشخيص الصحيح. قد يكون مثل هذا التحليل مطلوبًا لأسباب مختلفة، والتي تعتمد فقط على نوع سوائل الجسم.

تتميز أتمتة هذه العمليات بسوائل الجسم بالعديد من المزايا مقارنة بالطرق اليدوية التي تتضمن استخدام غرفة العد التقليدية. إنه سريع ومريح. وفي الوقت نفسه، لا تعتمد جودة التحليل على المستوى الشخصي لتدريب الموظف، حيث تضمن هذه الطريقة توحيد إجراءات الحساب المتمايزة. بالإضافة إلى ذلك، يتم تقليل عدد عمليات العد اليدوية التي تستغرق وقتًا طويلاً في غرفة العد.

ونظرًا لأن الخلايا الموجودة في سوائل الجسم، وخاصة العدلات، تتحلل بسرعة، فيجب تحليل العينة في أسرع وقت ممكن.

السائل النخاعي (CSF)

السائل النخاعي هو سائل الجسم الصافي على شكل محلول ملحي مع محتوى منخفض من البروتين بسبب الترشيح الفائق للدم. يملأ الفراغ بين الجمجمة والدماغ والبطينين ويحيط بالحبل الشوكي. يعمل السائل الدماغي الشوكي بمثابة "ممتص للصدمات" للدماغ والحبل الشوكي، وينقل الهرمونات والناقلات العصبية، ويساعد في إزالة المستقلبات السامة، ويوفر بيئة ثابتة للدماغ. يحتوي الشخص البالغ السليم على ما بين 100 و150 مل من هذا السائل، وتبلغ مستويات الإنتاج اليومية عادةً حوالي 500 مل.

يعد التحليل الخلوي للسائل النخاعي ضروريًا لتحديد أو استبعاد الأمراض التي تؤثر على الجهاز العصبي المركزي: الالتهابات التي تسببها البكتيريا أو الفيروسات أو الفطريات أو الأوليات. الالتهاب (مثل التصلب المتعدد أو التهاب الأعصاب الحاد مجهول السبب). التهاب السحايا (مثل الخلايا من الأورام المحيطية).

يتم أخذ العينات بشكل رئيسي عن طريق البزل القطني، وفي كثير من الأحيان عن طريق البزل الصهاريج. في المرضى الذين يعانون من تحويلة بطينية، مثل ما بعد الجراحة أو أثناء علاج استسقاء الرأس، يمكن أيضًا الحصول على عينات من التحويلة. يعد جمع السائل الدماغي الشوكي إجراءً روتينيًا، ولكنه لا يزال يحمل بعض المخاطر، مما يجعل من السائل الدماغي الشوكي مادة قيمة.

السائل الجنبي

يتراكم السائل الجنبي بين الطبقتين الجنبيتين في الحيز المحيط بالرئتين المعروف باسم التجويف الجنبي. في الحالة الطبيعية للجسم، لا يتجاوز حجم السائل الجنبي 10 مل. يعتبر فائض هذا السائل (الانصباب الجنبي) من الأمراض. هناك أسباب مختلفة لهذه الحالة، بدءًا من قصور القلب الحاد (السبب الأكثر شيوعًا) إلى الالتهاب الرئوي والانسداد الرئوي والسل وما إلى ذلك.

يتم عد خلايا السائل الجنبي وتمييزها لتحديد سبب الانصباب الجنبي ولتحديد أو استبعاد إصابة الرئتين أو غشاء الجنب بالبكتيريا أو الفيروسات أو الأوالي. على سبيل المثال، يشير التركيز العالي للعدلات إلى وجود عدوى، ولكن حتى الانصباب الجنبي غير المعدي قد يحتوي على عدد كبير من الكريات البيض، على الرغم من أنه في هذه الحالة قد يكون هناك المزيد من الخلايا وحيدة النواة. بالإضافة إلى ذلك، يتم العثور على الخلايا الظهارية باستمرار، ويمكن العثور على الخلايا السرطانية في السرطان. إذا كان السائل دمويًا، فغالبًا ما يكون ذلك نتيجة لغزو الورم.

السائل البريتوني

مثل السائل الجنبي، يعتبر السائل البريتوني غير طبيعي عندما يتجاوز حجم معين، عادة 10 مل. يتراكم السائل البريتوني في تجويف البطن. إذا تراكم هذا السائل بشكل زائد، تُعرف الحالة باسم الاستسقاء. في معظم الحالات، يكون الاستسقاء نتيجة لتليف الكبد، ولكنه يحدث أيضًا مع السرطان وفشل القلب الحاد وحتى مع مرض السل. يتم إجراء تحليل للسائل البريتوني لتحديد سبب وجوده والكشف عن التهاب الصفاق أو استبعاده. يشير التركيز العالي للعدلات عادةً إلى وجود عدوى، في حين أن الاستسقاء الدموي غالبًا ما يكون نتيجة لغزو الورم.

السائل التامور

انصباب التامور هو تراكم غير طبيعي للسوائل في تجويف التامور، وحجمه في الحالة الطبيعية لا يتجاوز 20-50 مل. قد يكون الانصباب التأموري ناتجًا عن التهاب التامور، أو الالتهابات الفيروسية، أو الاضطرابات الالتهابية، أو الفشل الكلوي، أو جراحة القلب، وما إلى ذلك. أما بالنسبة لسوائل الجسم المصلية الأخرى (السائل الجنبي، السائل البريتوني)، فإن تحليلها يعمل بشكل أساسي على تحديد مسبباتها أو اكتشافها أو استبعادها. الالتهابات.

السائل الزليلي

السائل الزليلي هو سائل الجسم الصافي الموجود في تجويف المفصل والذي يقلل الاحتكاك بين الغضاريف المفصلية أثناء الحركة. مع التهاب المفاصل والعدوى، يزداد حجم هذا السائل. يمكن أن يساعد عدد الخلايا وتمايزها في تحديد الطبيعة الالتهابية أو المعدية للانصباب المفصلي. يشير التركيز العالي جدًا لخلايا الدم البيضاء (ربما أكثر من 100000/ميكرولتر) مع غلبة العدلات إلى وجود عدوى في المفصل.

السوائل المنتجة أثناء غسيل الكلى البريتوني المتنقل المستمر (CAPD)

السائل الناتج عن غسيل الكلى البريتوني المتنقل المستمر (CAPD) ليس من سوائل الجسم الطبيعية، لأنه لا يتم إنتاجه من الناحية الفسيولوجية أو بسبب المرض، ولكنه فقط نتيجة لعلاج المرض. تعد عملية CAPD بديلاً لغسيل الكلى للمرضى الذين يعانون من أمراض الكلى. في هذه العملية، يتم استخدام تجويف البطن للمريض كغشاء يتم من خلاله إزالة السوائل والمواد من الدم عن طريق عملية التناضح. يستخدم هذا الإجراء للعدوى الشائعة في تجويف البطن. قد يشير ارتفاع خلايا الدم البيضاء مع ارتفاع عدد العدلات إلى التهاب الصفاق، في حين يعتبر فرط الحمضات عادة تأثيرًا ثانويًا لاستخدام القسطرة.

مساحة دوغلاس، أو مساحة خلف الرحم، هي مساحة تشريحية تقع في الجزء الخلفي من الحوض الصغير عند المرأة. وهي تقع بين الجدار الخلفي للرحم وعنق الرحم والقبو الخلفي المهبلي والجدار الأمامي للمستقيم. ومن الناحية الفسيولوجية يقال إن فضاء دوغلاس حر، أي أنه لا يحتوي على سائل أو أنسجة.

إن وجود آثار من السوائل في الحيز الموجود خلف الرحم قد يشير إلى الإباضة، وفي هذه الحالة لا يوجد سبب للقلق. يمكن رؤية كمية أكبر من السوائل أثناء الموجات فوق الصوتية عبر المهبل. من الضروري دائمًا تحديد طبيعة السر المكتشف - السائل الدموي، السائل البريتوني (الاستسقاء)، القيح، وما إلى ذلك. ولهذا الغرض، غالبًا ما يتم إجراء ثقب تشخيصي للمساحة خلف الرحم للحصول على مادة للبحث وتحديد السبب المحتمل من تراكم السوائل.

أسباب وجود السوائل في مساحة دوغلاس، كقاعدة عامة، هي أمراض الأعضاء التناسلية، ولكن ليس دائما. إذا ظهر السائل في الحيز خلف الرحم في أيام معينة من الدورة الشهرية، فلا يوجد سبب للقلق.

تحصل النساء والفتيات الناضجات جنسيًا بانتظام - خاصة بعد الإباضة مباشرة (بعد نصف الدورة مباشرة) - على كمية صغيرة من السوائل الحرة. ومع ذلك، إذا تم الكشف عن وجود السوائل في المرحلة الأولى من الدورة أو في نهاية الثانية، وبكميات كبيرة، فمن الممكن الاشتباه في أمراض الزوائد الرحمية أو تجويف البطن.

أسباب السوائل في الفضاء خلف الرحم

الأسباب الأكثر شيوعًا للسوائل خلف الرحم هي الأمراض:

• تمزق كيس المبيض.
• استسقاء المبيض.
• بطانة الرحم.
• تمزق الحمل خارج الرحم.
• التهاب الملحقات.
• سرطان المبيض؛
• التهاب الصفاق؛
• التهاب الأمعاء؛
• تليف الكبد.
• فرط تحفيز المبيض (بعد التحفيز الهرموني).

حسب طبيعة السائل الموجود خلف الرحم:

يمكن أن يكون وجود سائل دموي خلف الرحم ناتجًا عن:

• نزيف في تجويف البطن من أعضاء الحوض ،
• تمزق الحمل خارج الرحم ،
• تمزق كيسات المبيض
• بؤر بطانة الرحم البريتوني.

قد تكون كمية كبيرة من السائل الاستسقاء (البريتوني) بسبب:

• سرطان الأعضاء التناسلية الأنثوية (سرطان المبيض، قناة فالوب، عنق الرحم)،
• تليف الكبد,
• فشل الدورة الدموية.

قد يشير وجود سائل قيحي إلى:

• التهاب الحوض الصغير (على سبيل المثال، الزوائد)؛
• أو تجويف البطن (مثل التهاب الصفاق ومرض التهاب الأمعاء).

الأمراض التي يوجد فيها سائل حر في مساحة دوغلاس

تمزق كيس المبيض

كيس المبيض عبارة عن مساحة غير طبيعية داخل المبيض محاطة بجدار. هناك عدة أنواع من أكياس المبيض: الأكياس الجلدية البسيطة والمملوءة بالسوائل، وأكياس بطانة الرحم (أكياس الشوكولاتة التي تتشكل أثناء التهاب بطانة الرحم). في بعض الأحيان يمكن أن يتشكل الكيس في موقع الجريب غير الممزق في وقت قريب من وقت الإباضة - ويميل هذا النوع من الكيس إلى إعادة الامتصاص تلقائيًا. لسوء الحظ، يمكن أن يحدث أيضًا أن يشير الكيس الموجود في المبيض إلى وجود السرطان. قد لا تسبب الأكياس أي أعراض في بعض الأحيان، ويتم اكتشافها بالصدفة أثناء إجراء فحص روتيني بالموجات فوق الصوتية على البطن. ومع ذلك، في بعض الأحيان، يمكن أن يسبب وجودهم أمراضًا مختلفة:

• اضطرابات الحيض،
• نزيف غير منتظم لا علاقة له بالدورة الشهرية.
• وجع بطن،
• ألم في منطقة المبيض حيث يوجد الكيس.

ويحدث أن ينفجر الكيس، فتشعر المرأة بألم شديد، وأثناء فحص الموجات فوق الصوتية للبطن يتم اكتشاف وجود سائل في الحيز الموجود خلف الرحم. علاج الخراجات، إذا لم تظهر أي أعراض، يمكن أن يتكون فقط من مراقبتها المنهجية. ومع ذلك، إذا تسببت الأكياس في مشاكل أو تضخمت، فيجب إزالتها (إما بالمنظار أو تقليديًا، اعتمادًا على نوع الكيس).

تمزق الحمل خارج الرحم (خارج الرحم).

متى يحدث الحمل خارج الرحم؟ يحدث الحمل خارج الرحم عندما تنغرس البويضات المخصبة في مكان مختلف عن جسم الرحم. ويقدر تكرار الحمل خارج الرحم بحوالي 1٪ من جميع حالات الحمل. الموقع الأكثر شيوعًا للحمل خارج الرحم هو قناة فالوب. في الواقع، يمكن زرع الجنين في أي مكان تقريبًا: في عنق الرحم أو المبيض أو البطن. الأكثر خطورة على صحة وحياة المرأة هو الحمل في البطن أو عنق الرحم، ولكن لحسن الحظ، نادرا ما تحدث.

ما هي أعراض الحمل خارج الرحم؟ أثناء الحمل خارج الرحم، قد تحدث إفرازات غير طبيعية ونزيف، بالإضافة إلى آلام في البطن، وأحيانًا صعوبة في التبرز. في حالة تمزق الحمل خارج الرحم، يكون هناك ألم حاد في البطن، بينما يكشف الموجات فوق الصوتية عن وجود سائل في كيس دوغلاس. علاج الحمل خارج الرحم يكون دائمًا جراحيًا.

التهاب الزوائد

بالنسبة لالتهاب الملحقات، فإن ما يسمى بالمسار الصاعد هو سمة مميزة - حيث تدخل الميكروبات المهبلية إلى الأعضاء العليا في الجهاز التناسلي الأنثوي. حتى وقت قريب، كان العامل الممرض الأكثر شيوعًا الذي يسبب التهاب الزوائد هو المكورات البنية. وفي الوقت الحالي، وبسبب الانخفاض الكبير في حالات الإصابة بمرض السيلان، لم تعد البكتيريا هي الكائن الأكثر شيوعًا. يتم أيضًا تضمين مسببات الأمراض التالية في العوامل المسببة لالتهاب الملحقات:

• الكلاميديا.
• الميكوبلازما التناسلية والميكوبلازما الأخرى.
• القولونية.
• العقديات المجموعة ب والمكورات العقدية الأخرى.
• الغاردنريلة الغاردنريلة المهبلية.

الكلاميديا ​​والمكورات البنية لهما النصيب الأكبر في تكوين العدوى المؤدية إلى التهاب الزوائد.

ما هي أعراض التهاب الملحقات؟ بادئ ذي بدء، قد يكون هناك ألم في أسفل البطن، وعادة ما يكون الألم ثنائيا. بالإضافة إلى ذلك، قد يكون هناك عسر الجماع (ألم أثناء الجماع)، بالإضافة إلى إفرازات غير طبيعية من الجهاز التناسلي مرتبطة بالتهاب عنق الرحم أو المهبل. وجود نزيف غير طبيعي - نزيف بين فترات الدورة الشهرية أو نزيف حيض غزير للغاية وحمى أعلى من 38 درجة مئوية. قد يكشف الفحص بالموجات فوق الصوتية عن وجود سائل خلف الرحم. علاج التهاب الزوائد هو استخدام المضادات الحيوية وعلاج الأعراض.

سرطان المبيض

لا يسبب هذا السرطان أي أعراض لفترة طويلة، فوجود أعراض مثل ألم في أسفل البطن أو تضخم تجويف البطن أو نزيف مهبلي، للأسف، يشير إلى مدى خطورة السرطان.

التهاب الصفاق

إن وجود سائل قيحي في الحيز الموجود خلف الرحم قد يشير إلى وجود التهاب الصفاق ويتطلب توضيح التشخيص وفحص الجهاز الهضمي والمسالك البولية.

أعراض السوائل في مساحة دوغلاس

تعتمد الأعراض على سبب تراكم السوائل. على سبيل المثال، في حالة تمزق كيس المبيض، قد يظهر ألم في تجويف البطن، والذي يصبح بشكل دوري حادًا ومقطعًا، والغثيان والقيء، والإسهال، وفقدان الشهية. عند تمزق الحمل خارج الرحم، تظهر بقع ونزيف من المهبل، وألم في أسفل البطن، وألم في المبيضين، وأحيانًا شعور بعدم إفراغ الأمعاء بشكل كامل.

مع التهاب الزوائد، هناك ألم تشنجي مفاجئ على جانبي البطن، يتفاقم أثناء الجماع. وفي بعض الأحيان يمتد إلى الفخذ والفخذين. يرافقه الضعف والحمى أو الحالة الحموية.

ثقب تشخيصي من خلال القبو الخلفي للمهبل

يعد ثقب الحيز الموجود خلف الرحم طريقة غازية بسيطة، وهي مفيدة بشكل خاص لتشخيص النزيف في التجويف البطني لأعضاء الحوض وللكشف عن الحمل خارج الرحم المضطرب. يتم تنفيذ الإجراء تحت التخدير العام في المستشفى. يتم إجراء ثقب جيب دوغلاس من خلال المهبل باستخدام حقنة سعة 20 مل وإبرة بطول دقيقة. قطر 20 سم و 1.5 ملم. بعد إدخال المنظار، يقوم طبيب أمراض النساء بإدخال إبرة من خلال القبو الخلفي للمهبل، ثم يسحب محتوياتها إلى حقنة.

في بعض الأحيان يتم إجراء الثقب تحت توجيه الموجات فوق الصوتية لتجنب خطر ثقب أوعية الحوض الكبيرة. بعد إزالة الإبرة، يتم فحص محتويات المحقنة بعناية. يمكن أيضًا نقل المادة التي تم الحصول عليها للفحص الخلوي أو البكتريولوجي. قد يشير الكشف عن شظايا الجلطات أو السوائل الدموية إلى وجود نزيف في تجويف البطن بسبب الحمل خارج الرحم المضطرب. تعتبر هذه الحالة، مع وجود الأعراض السريرية والمخبرية والموجات فوق الصوتية، مؤشرًا لإجراء عملية جراحية لإزالة الحمل خارج الرحم المضطرب، وغالبًا ما يتم ذلك باستخدام الطريقة التنظيرية.

إن نقص المحتوى الناتج عن ثقب التجويف خلف الرحم لا يستبعد وجود نزيف في التجويف البريتوني أو وجود حمل خارج الرحم، خاصة عندما تشير الأعراض إلى تهيج الصفاق. قد يكون النزيف في حده الأدنى أو قد تكون هناك التصاقات ما بعد الالتهاب تمنع تجميع المواد للفحص. وجود سائل دموي يمكن أن يشير أيضًا إلى التهاب بطانة الرحم. يمكن أن تصاب المحتويات الدموية لتجويف دوغلاس بالعدوى (العدوى الفائقة)، مما يؤدي إلى تفاقم حالة المريضة المصابة بانتباذ بطانة الرحم. يشمل العلاج سحب الدم المتحلل من كيس دوغلاس وإزالة بطانة الرحم بالمنظار.

الفحص الخلوي للسائل

قد يكون اكتشاف كمية متزايدة من السائل البريتوني سببا كافيا للحفاظ على نشاط الأورام. يجب إرسال سائل الاستسقاء الذي تم جمعه في وقت ثقب تجويف خلف الرحم للفحص الخلوي لتأكيد أو استبعاد الورم. إن الكشف عن وجود الخلايا السرطانية في السائل من تجويف البطن يوفر معلومات قيمة للطبيب، لأنه قد يشير إلى ظهور ورم خبيث أولي في الأعضاء التناسلية الأنثوية.

بالنسبة للنساء اللاتي أصبن سابقًا بالسرطان وخضعن لعملية جراحية، قد يشير هذا العرض إلى عودة السرطان. كقاعدة عامة، يرتبط وجود الخلايا السرطانية في السائل البريتوني بارتفاع معدل انتشار سرطان الأعضاء التناسلية الأنثوية، وهو عامل إنذار غير مناسب لدى هؤلاء المرضى. تجدر الإشارة إلى أن الفحص الخلوي للسوائل من التجويف البريتوني ليس سوى وسيلة مساعدة للكشف عن الأورام الخبيثة في المبيض وقناة فالوب وعنق الرحم.

يمكن أن يكشف الفحص الخلوي للرواسب السائلة أيضًا عن عدد متزايد من الخلايا الالتهابية التي تظهر مع التهابات مختلفة في أعضاء الحوض. وأخيرًا، تكون زيادة كمية السائل البريتوني نتيجة لأمراض أخرى، مثل تليف الكبد أو فشل الدورة الدموية.

متى يجب أن ترى الطبيب؟

يجب على المرضى طلب العناية الطبية الفورية في حالة ظهور الأعراض التالية بالإضافة إلى زيادة السوائل في تجويف دوغلاس:

• وجع بطن،
• الجماع المؤلم،
• نزيف من الجهاز التناسلي ، غير مرتبط بالحيض ، نزيف الاتصال ،
• الغثيان والقيء،
• زيادة سريعة في محيط تجويف البطن ،
• حمى، قشعريرة،
• فقدان الوزن.

علاج

يعتمد العلاج على سبب وجود السوائل في الحيز الموجود خلف الرحم. على سبيل المثال، في حالة تمزق كيس المبيض، عادة ما تكون هناك حاجة لعملية جراحية لإزالة الكيس. إذا تمزق الحمل خارج الرحم، فيجب إزالته بالمنظار.